开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、研究内容
本课题拟采用超声波辅助有机溶剂法对枸杞中类胡萝卜素进行粗提，用柱层析法对粗提物进行分离纯化，并通过单因素试验对吸附剂种类、洗脱剂种类、吸附剂质量进行选择，优化柱层析条件。同时，采用DPPH自由基清除法、羟自由基清除法建立起对枸杞类胡萝卜素粗提物体外抗氧化活性的评价体系，对其体外抗氧化能力进行初步研究。以期为枸杞类胡萝卜素分离纯化以及其抗氧化产品的开发提供一定的参考。
二、文献综述
枸杞是我国传统的药食两用植物。随着人们对健康饮食要求的提升和养生理念的流行，枸杞成为热门的滋补食物。枸杞中的活性物质主要有枸杞多糖、类黄酮、类胡萝卜素、生物碱、多种维生素等，开发以这些活性物质为健康元素的保健品逐渐成为行业研究热点。研究证明，枸杞中类胡萝卜素的含量远高于其他果蔬中的含量[[1]]。枸杞作为抗氧化食品基本材料，有着广阔的发展前景[[2]]。目前国内外关于枸杞多糖的研究报道较为全面，但有关枸杞类胡萝卜素的研究较少[[3]]。
类胡萝卜素是所有光合生物以及一些非光合原核生物和真菌合成的亲脂性天然色素[[4]]。其生理功能主要有：VA原活性、抗氧化剂、细胞传递、免疫功能促进剂、UV皮肤保护剂、黄褐斑保护作用[3]。在已报道的枸杞类胡萝卜素中，包括11种类胡萝卜素酯和7种游离类胡萝卜素。其中含量最多的是玉米黄质双棕榈酸酯，约占总量的1/3~1/2甚至更高。其次，分别为beta;-隐黄质、玉米黄质单棕榈酸酯及其两种异构体、beta;-胡萝卜素。含氧类胡萝卜素极性大，易溶于丙酮等强极性溶剂，非含氧类胡萝卜素极性较小，易溶于石油醚等弱极性溶剂[1]。
植物类胡萝卜素的提取方法主要有溶剂提取、超声辅助提取、皂化辅助提取、酶辅助提取，以及新兴的超临界流体萃取。其中超声波辅助提取法具有快速、非热且高效的特点[4]，成本不高、操作简单。王星等优化了超声波辅助皂化提取枸杞皮渣中类胡萝卜素的条件[10]，但另有研究表明皂化处理不适合用于枸杞类胡萝卜素样品。提取的类胡萝卜素经过皂化, 其中玉米黄素双棕榈酸酯会部分转化成玉米黄素, 增加玉米黄素含量，但同时也破坏了枸杞类胡萝卜素, 使其总含量降低[5]。康保珊等[11]研究不同溶剂体系对枸杞类胡萝卜素提取结果的影响，指出在对枸杞类胡萝卜素提取效果较好的溶剂体系当中，非极性溶剂的比例应大于极性溶剂。曹有龙等[12]优化了超声提取枸杞鲜果类胡萝卜素的工艺，确定提取溶剂为四氢呋喃，超声功率300W，料液比1:15（g/mL），提取时间0.5h，超声频率60Hz为最佳条件。孙建霞等[13]通过单因素-正交法优化了超声波辅助提取鲜枸杞类胡萝卜色素，确定提取溶剂为正己烷，超声功率200W，料液比1：30（g/mL），提取时间40mim，提取温度50℃为最佳条件。
植物类胡萝卜素分离纯化应用的技术主要有：柱色谱、薄层色谱、膜分离、高速逆流色谱、高效液相色谱[4]。目前对枸杞类胡萝卜素采用的分离纯化方法主要有柱色谱法、薄层色谱法和反相色谱法。柱色谱法常用的吸附剂为不同比例的氧化镁和硅藻土[4,8,14]，Wang等[13]用不同极性的溶剂对枸杞类胡萝卜素提取液进行梯度洗脱，提出beta;-胡萝卜素可被正己烷洗脱，beta;-隐黄质和新黄质可被乙酸乙酯洗脱，玉米黄质可被乙酸乙酯-乙醇=80:20（v/v）洗脱。
常见的体外抗氧化方法有：氧自由基吸收能力法、总抗氧化能力法、DPPH法、FRAP法、总自由基清除能力法、Folin-Ciocalteu法、铜离子还原能力法、总氧自由基清除、ABTS法、低密度脂蛋白氧化法、光化学法、细胞抗氧化能力法等。由于果蔬中多种抗氧化物质存在一定程度的协同作用，这些方法都只能初步定性分析提取液的总抗氧化能力[2]。
三、研究方案
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