开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
1 本课题研究的国内外现状:
肉桂 (Cinnamomum cassia)，为樟科植物肉桂的干燥树皮。多于秋季剥取，刮去栓皮，阴干。药性辛、甘，大热。能散寒止痛、温经通脉，又能补火助阳、引火归元。不仅为传统的珍贵中药材，更是一种使用极为普遍的香料，常用作汤菜调味剂。肉桂中含有挥发油，主要化学成分是桂皮醛，其它尚含有肉桂醇、肉桂醇醋酸酯，肉桂酸，醋酸苯丙酯，香豆素，黏液，鞣质等。肉桂甲醇提取物及桂皮醛对革兰氏阴性菌及阳性菌有抑制作用。
近年来的研究证明细菌之间存在信息交流，许多细菌都能合成并释放信号分子，调控细菌的生物行为，如产生毒素、形成生物膜，以适应环境的变化，这一现象被称为群体感应调节(quorum sensing．QS)。这一感应现象只有在细菌密度达到一定阈值后才会发生，因此筛选出 QS 抑制剂（QSI）可以调节和控制细菌的各种行为，具有非常重要的生物学意义和实际应用价值。国内已有对中药材中细菌群体感应效应剂的筛选的研究，也有过人工合成QSI的报道，但对于公认安全的食源性化合物作为QSI的研究还较少，因此本实验拟对肉桂甲醇提取物的群体感应抑制作用进行研究，有望为食品防腐保藏提供新策略。
- 拟研究或解决的问题：
- 研究肉桂甲醇提取物对紫色杆菌群体感应的抑制作用；②研究肉桂甲醇提取物对铜绿假单胞菌浮游以及生物膜形成的影响。
3 研究手段：
3.1 肉桂甲醇提取物对紫色杆菌群体感应的抑制作用
（1）打孔法确定最小抑菌浓度MIC:取适量菌液加入灭菌好的LB液体培养基中，在600nm波长下测其OD值，直到OD值达到0.4,摇匀后1:1掺入1.5%的LB培养基，倒平板。在无菌操作台上风浴30min,待平板上培养基凝固并挥发完多余水分后,将平板分为相等的5个区域,每个区用大枪头打孔,用移液枪分别移取不同稀释浓度的肉桂粗提液100uL注入孔中。在同一平板中央位置打孔注入提取溶剂做对照。
- 肉桂甲醇提取物液体培养法测定MIC： 移取不同浓度的肉桂提取液加入600nm波长下OD值达到0.4的菌液中，做三个平行，继续培养，每隔两小时测一次OD600值，做生长曲线，观察有无抑菌作用，观察不同浓度提取液与对照液的生长曲线是否一致。
（3）肉桂提取物对CVO26紫色的抑制作用：
a)定性检测：LB液体培养紫色杆菌21724，并分别加入低于MIC的一系列浓度样品提取液，以样品提取溶剂作阴性对照，28℃下培养24小时，观察紫色素与对照组相比是否减少。
b)定量检测：CV026在LB培养基中活化两次后，取400ul接种至20ml的LB培养基中，28℃，震荡培养至OD600为0.4，加入C6-HSL信号分子和不同浓度的肉桂甲醇提取液后，继续培养24h。取10ml培养液，10000rpm 离心10min,弃上清，加入10ml二甲基亚砜，充分振摇，10000rpm 离心10min，取上清，OD580nm处测定吸光值。
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