槐树花中抗氧化活性物质的提取工艺优化
——黄酮类化合物的提取
摘要：黄酮类化合物具有良好的抗氧化活性和清除自由基的能力。槐花 (Sophora japonica)为豆科植物槐的干燥花及花蕾。槐树花提取物具有抗氧化活性。特别是对超氧阴离子自由基和DPPH自由基的清除能力较强。现如今已从花及花蕾中分离到黄酮苷元有槲皮素、山奈酚、异黄酮苷元染料木素，槐花米甲素等。研究表明，黄酮类化合物具有多种生理活性，如抑菌、抗病毒、抗衰老、防癌抗癌、增强机体免疫力。
关键词：槐树花； 抗氧化活性； 黄酮类化合物；提取
目前对槐花的研究主要集中于对黄酮的提取。本研究的目的是确定槐花黄酮类提取物清除自由基的活性。有关文献报道了从葛根、水芹、苦荞麦、银杏叶等中提取黄酮类物质，而对于槐花中黄酮类物质的提取尚未见有文献报道。本文对槐花中黄酮类物质的提取方法进行了研究，槐花中黄酮类物质的提取及含量的测定，有利于深入地研究槐花的药理与保健作用，为槐花的开发评价槐花的质量提供了理论依据和检测手段。
依据国内外对槐树花黄酮类抗氧化活性物质的现有研究成果，结合实验硝酸铝比色法测定醇提取物的总黄酮含量；HPLC法分析提取物的黄酮类物质组成与单体黄酮含量；测定提取物的总还原力、DPPH自由基清除率、FRAP值等抗氧化活性综合指标，考虑不同提取剂、时间、温度、微波功率等因素，以确定槐树花中黄酮类抗氧化活性物质的适宜提取条件。
在通过菊花中抗氧化活性研究中，有经典回流提取法、超声辅助提取法和组织破碎提取法提取的野菊花总黄酮，其中，溶剂浸提法操作简单，成本较低，易于实现工业化生产，但在具体提取操作时，影响其得率的因素较多，且因素与得率之间存在着复杂的非线性关系，采用多元回归的方法建立回归方程拟合实验数据，对回归方程进行寻优求解从而确定最优提取工艺，而经典回流提取法提取的总黄酮提取量最高，抗氧化活性也最强，说明野菊花总黄酮的量与抗氧化活性呈正相关。黄巧燕等采用清除DPPHbull;法，对加压提取和回流提取的菊花黄酮抗氧化活性进行了对比研究，结果表明，加压提取和回流提取的菊花黄酮对DPPHbull;清除率分别为90.0％和88.4％.王婷婷等研究发现不同品种菊花中总黄酮含量各异，但均具有明显的清除自由基能力，且清除自由基能力与其黄酮浓度呈明显量效关系。
样品溶剂的选择
称取槐树花样品适量，分别用水、30%乙醇、60%乙醇、无水乙醇、DMSO进行溶解，将其配成20.0mu;gbull;mL-1的对照品溶液，进行 DPPH法测定。经相关资料研究，以芒果苷为对照品进行测定，结果显示，样品溶剂为30%乙醇时，DPPH清除率最高。
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