不同松针中聚戊烯醇含量的HPLC测定文献综述

 2022-07-15 05:07

文献综述

摘要: 了解不同品种松针中聚戊烯醇的提取方法和检测方法等国内外研究进展。 不同品种聚戊烯醇的提取以不同产地的松树针叶中的聚戊烯醇为研究对象,经石油醚热回流提取、皂化、石油醚萃取、硅胶柱层析、乙酸乙酯-石油醚溶剂系统梯度洗脱,再用0.45 mu;m滤膜过滤后得澄清液。 不同品种漆酚的HPLC检测首先测定5~7个系列浓度的聚戊烯醇标准工作溶液HPLC色谱条件下的峰面积,以峰面积对相应浓度绘制标准工作曲线,然后测定样品试验溶液,用标准工作曲线对样品进行定量,使样品溶液中聚戊烯醇的响应值在本法的线性范围内。经反相色谱柱分离后用紫外检测器测定,外标法定量,根据保留时间和峰面积进行定性和定量测定。

引言:聚戊烯醇是松针叶的主要活性成分,与人体内所含的多萜醇结构和生物活性相似,具有抗老年痴呆、抗氧化、保护肝损伤、治疗硬化症等作用。黑松、湿地松、马尾松、雪松和圆柏树叶中均含有聚戊烯醇类化合物,且多以乙酸乙醋的形式存在,属于桦木聚戊烯醇类型。聚戊烯醇和多菇醇是生物体中对生物合成具有重要作用的类脂化合物。松针叶化学成分复杂,叶子中主要含有挥发油、黄酮类、脂类、苯丙素类、脂肪酸等活性成分,同时含有氨基酸、微量矿元素、维生素、叶绿素、不饱和脂肪酸、酶等活性物质。脂类成分聚戊烯醇普遍存在于松针叶中,且为其主要活性成分之一。聚戊烯醇是由不同数目的异戊烯基单元按一定顺序排列而成的类脂化合物。聚戊烯醇按结构分为 4 类: ①全反式茄尼醇类聚戊烯醇; ②三反式多顺式类聚戊烯醇; ③二反式多顺式桦木萜醇类聚戊烯 醇; ④多萜醇类。松针叶中聚戊烯醇均属于桦木聚戊烯醇型结构,大多数以乙酸酯的形式存在,与人体内所含的多萜醇结构相似,具有多种药理活性。现代药理学研究发现,松针叶聚戊烯醇无毒、无突变、无致癌、无致畸作用,在防治老年痴呆、保护肝损伤、抗氧化、治疗硬化症等方面具有较好的活性。同时,目前国内还未发现松针叶聚戊烯醇类制剂开发应用于临床,基于药理活性进行制剂研究具有重要意义和应用价值。

  1. 聚戊烯醇

聚戊烯醇(Polyprenols)类化合物是由一系列异戊烯基单元聚合和终端异戊烯醇组合而成的亲脂弱极性化合物,属于萜醇类化合物。聚戊烯醇广泛存在于动物、植物、微生物中,与动植物及微生物的生命活动密切相关。聚戊烯醇在植物体内以末端不饱和的形式存在,通常称之为聚戊烯醇。多萜醇广泛存在于人和哺乳动物的肝、脾、肾等器官中。多萜醇是细胞膜的重要组成成分,在糖蛋白的合成、维持细胞膜的稳定性方面发挥着重要功能。目前,二萜中的紫杉醇、视黄醇,三萜中的角鲨烯、人参皂苷,四萜中的胡萝卜素、番茄红素等都是研究热点。多 萜醇在体内含量为脏器湿重的0.01%-0.03%,由于动物体内多萜醇含量极低,且分离纯化成本昂贵,因此限制了多萜醇的开发及应用。聚戊烯醇及其酯类化合物是原核细胞和真核细胞天然膜的重要组成成分之一,参与糖蛋白的生物合成,维持植物正常生理代谢,是植物化学分类学重要的标志性化合物

2.松针叶聚戊烯醇的提取方法

松针叶聚戊烯醇属于低极性类脂化合物,易溶于石油醚、丙酮等弱极性溶剂,一般以石油醚作为提取溶剂。目前松针叶主要采用回流法提取聚戊烯醇,在小剂量松针叶提取的含量测定等试验中也常采用超声提取技术。

2.1 回流法

目前主要采用回流法提取松针叶中的聚戊烯醇。松针叶聚戊烯醇具有脂溶性的性质,易溶于石油醚、正己烷、丙酮等非极性或弱极性溶剂,根据相似相溶原理,常选用石油醚、丙酮、正己烷、三氯甲烷等作为提取媒介。采用回流提取法,以石油醚为溶剂,料液比 1∶ 8 ~ 1∶ 10,提取时间 15 h,真空减压浓缩,从落叶松和水杉针叶中得到桦木聚戊烯醇型聚乙烯醇乙酸酯,落叶松聚戊烯醇提取率 9. 7% ,得率较高。还使用索氏提取器回流提取马尾松、黑松、湿地松、雪松等松针叶中聚戊烯醇,提取溶剂依然用石油醚,不同的是用旋转薄膜蒸发器浓缩得到提取物,提取率最高达 6. 6% 。回流法提取松针叶中聚戊烯醇的技术目前已经较为成熟。

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