解脲支原体特异性蛋白的基因工程表达及制备文献综述

 2022-12-07 04:12

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

  1. 立题背景及研究现状

解脲支原体是脲原体属中的唯一的一个种,因为其生长需要尿素而得名。菌落微小,且直径仅有15~25um,必须在低倍显微镜下进行观察,所以旧称其为T株(tiny strain)。解脲支原体的菌落表面有粗糙的颗粒,其在合适条件下能够形成典型的荷包蛋样的菌落。另外它生长需要胆固醇和尿素,并且以分解尿素作为其代谢的特征,能够产生氨氮,从而使得培养基的PH上升。近年来,国内外学者对其进行了深入研究。

解脲支原体的免疫学研究概况

1)抵抗力 解脲支原体对热的抵抗力与细菌极为相似。其对环境渗透压较为敏感,而渗透压的突变可导致细胞的破裂。其对重金属盐、石炭酸、来苏尔和一些表面活性剂较细菌敏感,但是对醋酸铊、结晶紫和亚锑酸盐的抵抗力比细菌大。对影响壁合成的抗生素如青霉素不敏感。

2)致病性免疫性 解脲支原体不侵入机体组织和血液,而是在泌尿生殖道上皮细胞粘附并定居后,通过不同机制引起细胞损伤,如获取细胞膜上的脂质与胆固醇造成膜的损伤,释放神经(外)毒素、磷酸酶及过氧化氢等。巨噬细胞、IgG及IgM对解脲支原体均有一定的杀伤作用。

3)感染症状 潜伏期为1到3周,典型的急性期症状与其他非淋病性生殖泌尿系统感染相似,表现为尿道刺痛,不同程度的尿急、尿频以及排尿刺痛,特别是当尿液较为浓缩的时候明显。尿道口轻度红肿,分泌物稀薄,且量较少,为浆性或脓性,多需用力挤压尿道才见分泌物溢出,常于晨起尿道口有少量粘液性分泌物或仅有痂膜封口,或者出现污秽裤裆。 亚急性期常合并前列腺感染,患者常出现会阴部胀痛、腰酸、双股内侧不适感或在做提肛动作时有自会阴向股内侧发散的刺痛感。女性患者多见以子宫颈为中心扩散的生殖系炎症。多数无明显自觉症状,少数重症病人有阴道坠感,当感染扩及尿道时,尿频、尿急是引起病人注意的主要症状。感染局限在子宫颈,表现为白带增多、浑浊、子宫颈水肿、充血或表面糜烂。感染扩及尿道表现为尿道口潮红、充血、挤压尿道可有少量分泌物外溢,但很少有压痛出现。

4)感染途径 流行病学调查表明,36%正常男性可分离到解脲支原体,据﹤福建医科大学学报﹥1999年第33卷第二期资料:福州地区273名无临床症状妇女进行生殖道Uu(解脲支原体)培养,132名阳性,阳性率48.35%。在对孕妇的研究中:解脲支原体(UU)在孕妇生殖道的寄居率可高达80%。所以,检查出支原体、衣原体寄居是很寻常的事。实际上,医生对正常人进行全身的微生物培养,至少可以分离出数十种病原体的,但这并不代表其有数十种疾病。国内外资料提示,不孕症夫妇的宫颈粘液、精液中解脲支原体培养阳性率高达50%以上,由此可见,解脲支原体与不孕症的发生可能有相关关系。解脲支原体感染还可造成流产,有人从流产的组织中检查出解脲支原体的阳性率高达40%以上。因此,对不明原因的流产,尤其是多次流产者,应考虑解脲支原体感染的可能。妇女妊娠后,由于孕激素的增加,抑制了细胞免疫,机体抵抗力下降,更容易受解脲支原体的感染。

5)诊断 解脲支原体实验室检测方法有:形态学检查、支原体培养、抗原检测、血清学方法和分子生物学方法。解脲支原体MB抗原的研究表明:MB抗原是解脲支原体被识别的主要外膜抗原,具有种特异性,包含血清和交叉反应的抗原决定簇。编码MB抗原的基因长1200多个碱基、N端三分之一为保守区,包含群特异的抗原决定簇;C端三分之二是由重复序列组成的可变区,包含型特异的抗原决定簇,对该抗原的研究及对于疾病的发病机制和免疫机制起重要作用。MB抗原位于解脲支原体膜的表面,N端固定于膜上使C端重复区微生物周围的微环境。N端可以作为其分群分型的基础,C端最可能首先与宿主的防御系统相遇而引起主要的抗体反应,是理解它的发病机制和免疫机制的基础。MB抗原与疾病的关系,以及它在疾病中的作用还有待进一步探讨。

二、拟研究或解决的问题

1、利用基因工程手段制备表达解脲支原体

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