一、课题背景
当归补血汤（Danggui Buxue Decoction，DBD）出自金元时代名医李东垣所著的《内外伤辨惑论》，由黄芪（炙）和当归（酒洗）按 5∶1 组成。在历版的《方剂学》教材中均作为补血生气的经典名方。中医有云，游行之血不能速生，无形之气应当急固，有形之血生于无形之气，故用黄芪大补脾肺之气，以滋气血生化之源。配伍当归味甘性温，归肝、心、脾经，养血和营[1]。当归补血汤作为中药名方，在临床用于治疗气血亏虚、肝肾阴虚、产后血虚、头疼发热等，还兼具有保心护肝、免疫调节等作用。当归补血汤可通过调节免疫系统，细胞因子的表达等充分发挥其益气效果，发挥益气效果还与抗炎作用有关，表现为影响炎症因子的表达以及介导与炎症因子表达有关细胞通路[2]。当归补血汤联合硫酸亚铁片治疗缺铁性贫血有显著补血效果，能大幅度提高体内血红蛋白和血清铁蛋白含量[3]。
由于其仅由 2 味中药配伍而成，又具有多种临床功效，对于化学成分庞杂、治疗机制复杂的中药来说是一个相对简单的研究对象，因此成为了研究热点。
- 要解决的问题
目前对于 DBD 药效物质基础已经做了大量的研究工作，但是仍存在一些问题。首先，化学成分研究是物质基础研究的基础，中药复方剂中化学成分复杂，现阶段多数实验采用高效液相色谱法对中药液先进行分离，再采用检测器进行物质检测，但该过程较为耗时。寻找更加快捷的分析方法有利于物质基础的研究。
此外，根据动物实验结果表明，DBD除了对于多种精神类疾病例如糖尿病抑郁症有治疗效果，对肿瘤细胞也有一定的抑制作用，但由于其多靶点、多层次、多条通路协同作用等方面对疾病进行干预，其发挥药理作用治疗精神类疾病的治疗机制尚不明确，这对于DBD更进一步的基础研究起到阻碍作用。
- 可行性分析
目前，已有很多学者针对 DBD 不同提取部位、单体化合物进行药理研究，筛选活性成分，阐明药效物质基础。目前普遍认同，当归补血汤中益气物质为毛蕊异黄酮等极性较强的物质，而补血物质为阿魏酸和异黄酮类[4]。
DBD的大量研究表明，其有效成分包括皂苷类、挥发油类、有机酸类、黄酮类以及多糖类。黄月纯等[5]采用GC:BD-1石英毛细管色谱柱(30mtimes;0.25mm)对DBD挥发油中的有效成分进行了分离，得出其挥发油类成分主要包括反式-藁本内酯、alpha;-蒎烯、油酸、亚油酸、正丁基苯酞以及正丁烯基苯酞。黄酮类成分在280nm波长下采用紫外检测器，其中包括毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、刺芒柄花素苷以及刺芒柄花素等。宋越等[6]使用Zorbax SB C18 对有机酸类做出分离使用质谱进行检测，得出其成分包括绿原酸、阿魏酸、异绿原酸以及阿魏酸。
黄兆胜等[7]以T淋巴细胞百分数为指标，研究对于气虚小鼠发挥益气作用的有效成分。实验表明，全方对于气虚小鼠的T淋巴细胞百分数有明显的提高效果，各萃取部分的T淋巴细胞百分数增强效果均弱于全方，且与全方效果有显著性差异(Plt;0.05)。将正丁醇层与水层合并给药其作用效果最强，与全方相比无显著性差异(Pgt;0.05)。白细胞介素 (IL-12) 、白细胞介素-17 (IL-17) 和白细胞介素-18 (IL-18) 是炎性病变的促进因子，肾脏受到损伤时，体内表达较高[8]。倪文娟等[9]发现DBD可以使IL-12、IL-17、IL-18在体内的表达下调，减缓炎症反应。当归补血汤的作用具有多样性，能够使得血清和肾组织中的炎症因子含量均下调。
江芳等[10]进行了DBD对于H22、K562以及Yac-1三种肿瘤细胞的体外抗肿瘤试验，试验结果显示给药组细胞明显变小变圆、表面粗糙、光泽度不佳、已有部分破裂。且与环磷酰胺组相比无明显差异(Pgt;0.05)。张奉梅等[11]给予荷瘤小鼠加味当归补血汤20d后测量给药组小鼠的全血粘度和血小板最大聚集率，对比模型组（荷瘤小鼠）小鼠二者均降低，与空白组（健康小鼠）相比各项指标均无显著性差异(Pgt;0.05)。恶性肿瘤普遍存在血液高凝状态，试验结果表明DBD能够有效降低血液黏度，抑制肿瘤转移，改善血液流动。
- 研究方法和内容
目前大多数实验都采用高效液相色谱法来建立相应的指纹图谱，也有采用气相色谱与质谱联用来建立指纹图谱。本实验采用LC-MS分子网络方法来识别DBD中有效成分以及体内代谢后的活性成分，具体研究内容如下：
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