开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
解决的问题:
通过实验筛选发现麦冬的抗凝血活性部位。
采用的研究手段:
通过体外抗凝和血小板聚集实验来筛选麦冬的抗凝血部位,主要方法如下:
抗凝血实验:
取ICR小鼠,随机分组分为对照组,各个麦冬皂苷组,糖苷组以及苷元组,连续给药3天,末次给药1h后,用内径1mm的毛细管插入小鼠内眦球后静脉丛取血,自血液注入管内开始计时,血液注满管后,每隔30s折断两端毛细管,观察折断处是否有血凝丝,至血凝丝出现时开始计时,此时间即为凝血时间CT。
抗血小板聚集实验:
体内实验:取Wistar大鼠,随机分组分为正常对照组、模型对照组、各个麦冬皂苷组,糖苷组以及苷元组,按一定剂量连续给药七天,第6天给药2h后,除对照组,其他组sc0.1%肾上腺素2次,间隔4h。在注射中间(前后间隔2h)将大鼠浸入冰水中(0-2℃)5min,禁食12h,次日取血至含有3.8%枸橼酸钠的EP管内,轻轻摇匀,制备富血小板血浆(1500r/min,10min)及贫血小板血浆(3000r/min,10min),以二磷酸腺苷为诱导剂,应用血小板聚集凝血因子分析仪,通过Born比浊法测定不同化学部位对Wistar大鼠血小板聚集的影响,比较作用强弱。
体外实验:取大鼠8只,禁食12h后,用10%水合氯醛麻醉,颈总动脉插管取血至含有3.8%枸橼酸钠的EP管内,轻轻摇匀,制备富血小板血浆(1500r/min,10min)及贫血小板血浆(3000r/min,10min),以二磷酸腺苷为诱导剂,应用血小板聚集凝血因子分析仪,通过Born比浊法测定不同化学部位对Wister大鼠血小板聚集的影响,比较作用强弱。
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