一、课题的研究背景、意义和目的
多糖(polysacharides,PS)广泛存在于植物、动物和微生物组织中,是具有多种生物活性的天然大分子化合物。多糖与蛋白质一样,具有生物大分子的复杂结构,显示特定的生理和生物学活性,其中包括免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗病毒、抗炎、抗菌、抗惊厥、镇静、止喘、降血压、抗衰老、抗疲劳、抗突变、抗凝血等活性。真菌多糖是从真菌子实体、菌丝体及发酵液中分离出的活性物质,是由10个以上的单糖主要以beta;-1,3和beta;-1,6糖苷键连接而成的天然高分子聚合物。在国际上,被称为“生物反应调节剂”[1]。真菌多糖是不会为淀粉酶分解的,还会透过人胃肠壁到血管,连通心、脾和肝等脏器,通过药物的作用,实现人体各种器官疾病的治疗,不会受到淀粉酶的分解,具有广阔的应用前景,已经成为研究的热点。药理学和免疫学的许多研究表明,菌类多糖是扶正固本、滋补强身、抗衰老最有效的成份之一,具有广泛的药理活性,对动物的生命活动有着十分重要的意义。
近年来,真菌多糖因其独特而广泛的保健疗效而颇受国内外消费者欢迎[1],但由于菌类多糖提取液杂质多、颜色深,须经过脱色处理才能进行深加工利用。因此,摸索出一种较好的脱色方法对于多糖的加工提纯很必要。随着真菌多糖在生物学、医学、药物学、食品科学等领域的应用逐渐扩大,许多学者对其的结构分析、提取纯化工艺和临床应用等方面的研究也越来越关注。
本课题研究所用真菌为昆虫肠道真菌和海洋生物内生真菌,相关实验研究在国内外还相对较少,旨针对目前国内外报道的有关真菌多糖的脱色纯化工艺进行了总结借鉴,结合已有的实验方案,摸索内生真菌多糖的脱色条件,以期找到更具优势的内生真菌脱色工艺方法。实验中采用活性炭吸附法、双氧水氧化法、及大孔吸附树脂和大孔离子交换树脂方法比较内生真菌多糖的脱色效果,以脱色率、蛋白去除率和多糖保留率作为实验结果的评定标准,通过脱色工艺研究,以期得到纯化多糖组分,为今后多糖活性研究打下基础。
二、课题研究的主要内容
1.不同脱色方法对内生真菌多糖脱色研究。
实验分别以活性炭吸附法、双氧水氧化脱色,和大孔吸附树脂以及离子交换树脂脱色。其中脱色方法选用的大孔树脂为吸附树脂和离子交换树脂各四种。
a.用水提多糖粗品制备多糖溶液,并测定多糖含量、蛋白含量以及色素含量。
b.加入一定量脱色剂(活性炭、双氧水、树脂),并在设定条件下进行脱色。
c.脱色完成后对样本进行测定,包括多糖含量、蛋白含量以及色素含量。
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