研究背景
白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病,按照起病的急缓可以分为急性白血病和慢性白血病。急性髓细胞性白血病(Acute myeloid leukemia,AML)是髓系造血干/祖细胞恶性疾病。以骨髓与外周血中原始和幼稚髓性细胞异常增生为主要特征,临床表现为贫血、出血、感染和发热、脏器浸润、代谢异常等,多数病例病情急重,预后凶险,如不及时治疗常可危及生命。
目前,治疗AML的常用方法是化疗,先采用柔红霉素(DNR)、伊达比星(去甲氧柔红霉素)等进行诱导治疗,再采用大剂量阿糖胞苷(Ara-C)进行巩固治疗。但是阿糖胞苷对造血系统也有毒副作用,主要是骨髓抑制,白细胞及血小板减少,严重者可发生再生障碍性贫血或巨幼细胞性贫血;而白血病、淋巴瘤患者治疗初期可发生高尿酸血症,严重者可发生尿酸性肾病。另一种方法是造血干细胞移植,移植的复发率可能较低,但却存在早期或晚期的移植相关并发症,而且费用较高。因此,拓宽研究思路,研究新型的治疗AML的药物迫在眉睫。
研究目的及意义
黄酮类衍生物具有广泛的应用途径。在最近几年的研究中发现黄酮类化合物具有广泛的抗肿瘤作用,具有多途径、多环节、多靶点的作用。因此,有关它的抗肿瘤机制,全世界有很多地区都在研究。在治疗白血病方面,以人白血病细胞株为体外模型,分别采用台盼蓝排斥实验和流式细胞术对26种黄酮类化合物的细胞生长抑制作用和凋亡诱导作用进行了考察,并结合蛋白免疫印迹技术(Western Blotting)对其作用机制进行了初步探讨。台盼蓝排斥实验结果显示,26个黄酮类化合物中有11个化合物在体外表现出明显的生长抑制作用,其IG50值在5-20mu;M之间。这种对恶性细胞的抑制作用,具有比较大的应用前景。
本实验将通过不同方面研究黄酮类衍生物对AML细胞的作用,包括抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡,为黄酮类衍生物正式用于AML的治疗提供相关的理论基础。
研究内容
- 通过CCK-8实验,研究LW-213对白血病细胞Kasumi-1的生长抑制作用。
- 通过流式双染实验,研究LW-213对白血病细胞凋亡诱导作用的影响。
3、通过细胞内钙离子荧光检测实验,研究LW-213诱导的白血病细胞凋亡与胞质钙离子水平之间的联系。
4、通过Lysosensor实验,研究LW-213诱导的白血病细胞凋亡与溶酶体酸度变化之间的联系。
5、通过Western Blot实验,研究LW-213对Caspase依赖的凋亡途径中PARP-1、Caspase-3、Caspase-9等相关蛋白表达的影响。
