保健食品中番茄红素检测方法的研究文献综述

 2023-01-09 05:01

课题背景:

番茄红素是一种功能性、脂溶性的天然色素,它主要存在于番茄、西瓜、葡萄、柑橘和芒果等水果中,番茄红素也广泛存在于人体的各种器官和组织中,主要分布在人的血液、肾上腺、肝脏、前列腺、乳腺、卵巢、子宫、消化道等器官中,其中血液、肾上腺、肇丸、肝脏等含有较多的番茄红素;番茄红素在人体中以顺式存在的比例较高[1]。化学结构上属于类胡萝卜素,可溶于脂肪和油脂中,并呈现出红色。番茄红素是目前已知的最有效抗氧化活性物质,其抗氧化能力是beta;—胡萝卜素的2.0—3.2倍,是维生素E的100倍。科学研究己证实,番茄红素具有抗氧化和清除自由基能力,能减缓动脉粥样硬化,阻止低密度胆固醇的氧化,可有效防止心血管疾病的发生,它还具有抑制基因突变,预防恶性肿瘤,延缓人体衰老,提高肌体免疫力等多种功能[2-3]。1910年Wilatatterbe和Echer提出了番茄红素的分子式为C40H56,分子量536.85[4],是胡萝卜素的异构体;1930年Karrer等人公布了番茄红素的分子结构[5],是由 11个共扼,2个非共扼的碳碳双键组成的直链型碳氢化合物,从此番茄红素的结构得到了确立。

番茄红素是一种呈红色的脂溶性色素,不溶于水,难溶于甲醇、乙醇,可溶于乙醚、石油醚、正己烷、丙酮,易溶于氯仿、二硫化碳、苯等有机溶剂[6]。番茄红素的生产制备主要的方法有粉碎发,浸提法,酶反应法等 [7-9]。目前最常用的检测方法多为:1 国标法——紫外-可见分光光度法(外标法):以苏丹I色素为标品,用无水乙醇配制标准溶液,在番茄红素的最大吸收波长485nm下,以蒸馏水为空白,分别测定吸光度。以测得的吸光度为纵坐标,苏丹I色素标准溶液所相当的番茄红素浓度为横坐标,绘制标准曲线,同法测样品的吸光度计算样品浓度;2 紫外-可见分光光度法(公式法):准确称取试样,加入少量甲醇除去其它色素,将抽提液过滤,剩余的残渣再加入少量甲醇。重复上述操作,直至滤液无色,弃去滤液。用少量正己烷分数次按上述步骤提取番茄红素,直至滤液无色为止。滤液移入棕色容量瓶中,用甲苯定容,摇匀,即为番茄红素提取液。将提取液在其最大吸收波长 472nm 下测定其吸光值,然后按下列公式进行计算:

番茄红素的含量=[(Atimes;Mtimes;稀释倍数)/btimes;Etimes;W)]times;100%

式中:A —样品的吸光值;b—紫外分光光度仪的样品池厚度;M —番茄红素的分子量;稀释倍数—样品的稀释比例;E —番茄红素在472nm 下的最大摩尔吸光系数;W—样品的重量(mg) ;3 高效液相色谱法:称取番茄红素的标准品,用甲苯溶解至容量瓶中,配成不同浓度的番茄红素的标准甲苯溶液,然后分别进样,在波长472nm下测得番茄红素标准样品的色谱图,并根据浓度—峰面积作出番茄红素的标准工作曲线。称取一定量的番茄红素样品,用甲苯直接溶解于容量瓶中,过滤后取溶液进行色谱分析,并将峰面积代入标准工作曲线公式,求出番茄红素的含量。

;4差示扫描量热法:差示扫描量热法测定纯度是根据熔点的下降来确定杂质的含量,它是以范特霍夫熔点下降的理论为基础,在稀溶液中,由分子大小相近的杂质引起的熔点下降规律符合范特霍夫公式[10]

番茄红素含量的检测方法有多种,由于番茄红素容易被氧化的特性,使很多的检测手段应用达不到检测目的,重现性、稳定性、精密度达不到标准,所以需要一种可以阻断或减慢番茄红素氧化的方法来减少测量过程中番茄红素的损失,从而增加准确性,同时,对番茄红素低含量的样品的检测需要一种高灵敏度的检测方法,使检测结果精准,直观。所以设计抗氧化剂的替换实验来寻找番茄红素检测过程重现性、稳定性、精密度不达标准的原因;采用不同流动相组成和比例来优化检测方法。

实验流程:

检测仪器Agilent1100型HPLC、UV-2450型可见光紫外分光光度计可供使用。

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