1.概述
多糖广泛分布于自然界的多种生物体中,尤其是动物细胞膜、植物细胞壁和微生物细胞壁中,是构成生命体的分子基础之一。人们通过研究发现多糖具有多种药理活性,它不仅可以作为广谱免疫促进剂调节机体免疫功能,还可以在抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血糖、抗辐射等方面发挥广泛的药理作用。黄芩作为传统中药,其多糖成分在抑制病毒活性、抗氧化活性等方面取得了一定研究成果。
由于黄芩中的主要成分是黄酮类化合物,因此国内外学者主要是对黄酮类化合物进行研究,较少见对黄芩多糖的研究。本文主要探讨了黄芩多糖的提取与分离纯化研究,对于黄芩多糖的提取,采取的是传统的水提醇沉法,但是又用了一种较新的响应面分析法对其进行工艺优选。然后分离纯化主要用的DEAE-52纤维素柱进行初步分离,然后用葡聚糖凝胶柱进行进一步纯化。
2.拟定的研究手段
- 对水提醇沉法进行工艺优化,选择固液比、提取时间、提取次数三个因素为自变量,以黄芩多糖的提取率为响应值,设计三个因素的三元二次回归正交旋转组合分析试验。
- 取药材用石油醚冷浸脱脂后,按最优工艺水提醇沉提取多糖。
- Sevag法脱蛋白,静置,去上清液,沉淀冷冻干燥。
- 对DEAE-52纤维素进行预处理,湿法装柱。
- 取脱蛋白后的粗多糖溶解,离心,上样。
- 充分吸附后,以蒸馏水、0.1、0.3、0.5、1mol/L的NaCl溶液洗脱,控制流速1ml/min,分管收集洗脱液。
- 用苯酚-硫酸法跟踪监测各管多糖含量,将含糖的收集起来,合并相同梯度的含糖管,氮吹浓缩,然后冷冻干燥,得到初步纯化的多糖样品。
- 对葡聚糖凝胶进行预处理,湿法装柱,将初步纯化的多糖样品上样,最后得出相对分子量近似的多糖。
3.综述
多糖的提取分离纯化
摘 要:植物多糖作为一类重要的天然活性物质,其最大优点是毒副作用小,来源广泛,具有多种生物活性,如抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗氧化、抗病毒和抗辐射等。[1]因此其应用具有广阔的发展前景。本文对多糖的提取、分离纯化方法以及检查测定进行综述。
关键词:多糖;提取;分离纯化;工艺优化
正文:
多糖广泛分布于自然界的多种生物体中,尤其是动物细胞膜、植物细胞壁和微生物细胞壁中,是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物,是构成生命体的分子基础之一。多糖在自然界中储量丰富,主要分为植物多糖、动物多糖以及微生物多糖3类。自1960年以来,人们陆续发现多糖具有多种药理活性,它不仅可以作为广谱免疫促进剂调节机体免疫功能,还可以在抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血糖、抗辐射等方面发挥广泛的药理作用。迄今为止,已有300多种多糖类化合物从天然产物中分离出来,其中从植物中提取的水溶性多糖最为重要。因为它药理活性强,来源广泛,细胞毒性低,安全性强,毒副作用较小,已引起医药界的广泛关注,并成为当今生命科学研究的热点之一。本文对多糖的提取、分离纯化方法进行综述。
- 中药多糖的提取
1.1脱脂[2]
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