一、研究背景
石松类生物碱(Lycopodium alkaloids)是从蕨类植物石松(Lycopodium japonicum) 和其近缘植物中分得的结构类似,具有相同生源的一类结构奇特且骨架变化多样的生物碱【1,2】。石松类植物中的许多种为民间传统植物药,多用于治疗风湿疼痛、肌肉痉挛、跌打损伤、疮痈肿毒、灭虱、虫,并治毒蛇咬伤。十九世纪八十年代 ,我国科学家从民间药草药-千层塔(蛇足石杉)中分得具有强效 、低毒 、高选择性抑制乙酰胆碱酯酶活性的生物碱石杉碱甲(huperzineA ),引起世界各国科学家的广泛关注。临床试验研究表明石杉碱甲对治疗重症肌无力和早老性痴呆有显著疗效 , 被国际上列为第二代乙酰胆碱酯酶抑制剂之一 , 是近年来广为瞩目的天然药物成分【3,4】。为了寻找新的活性成分 , 国内外学者对石松类生物碱的合成 、活性 、石杉碱甲结构改造和活性 、蛇足石杉和类似植物等成分的分离鉴定进行了大量研究 ,发表了多篇高水平学术论文。其中植物化学成分的分离鉴定得到了许多结构奇特且具有较好活性的生物碱 ,也使石松类生物碱的研究成为国际天然药物化学界一道靓丽的风景线。
石松类植物主要是石松科 ( Lycopodaceae)和石杉科 (Huperziaceae)的蕨类植物。其中,石松科植物共9属,全球广布,我国有6属,为石松属(Lycopodium)、小石松属(Lycopodiella)、拟小石松属(Pseudolycopodiella)、垂穗石松属(Palhinhaea)、扁枝石松属(Diphasiastrum)和藤石松属(Lycopodiastrum)。石杉科植物共2属,为石杉属(Hperzia)和马尾杉属(Phlegmariurus),广布于热带和亚热带,在我国主产西南、华南、东北、西北和华东地区【5,6】。国内外学者对石松科植物化学成分的研究主要集中在石松生物碱上。石松生物碱的基本骨架为三环或四环稠合而成,根据所含C和N数目的不同分为C16N1、C16N2等类型,也有少量生物碱是C17N3或少于C16骨架【7】。加拿大科学家Ayer【1】将石松生物碱划分成四种类型,即lycopodine 型、lycodine型、fawcettidane型和miscellaneous型。
藤石松,石松科藤石松属蕨类植物,民间又称“舒筋草”,多年生草本,长可达4m。主茎下部有叶疏生,叶钻状披针形,先端长渐尖,膜质,灰白色,向上的叶较小,绿色,厚革质,有早落的膜质尖尾。生长于森林边缘及灌木丛中。分布于华南、西南及湖北、湖南、福建、台湾等地。植物的全草可供药用,能舒筋活血。治风湿关节痛,跌打损伤,筋骨疼痛,月经不调及脚转筋【8】。
二、研究意义
自1881年从扁枝石松分得第一个石松生物碱Lycopodine开始 , 研究人员已从石松类植物中分离鉴定出多种骨架类型的生物碱,其中石杉碱甲对乙酰胆碱酯酶表现出强的抑制活性,由于石杉碱甲在植物中的含量很低, 其植物为多年生,而且提取是用全草, 为一次性使用的植物资源,所以它的应用受到很大的限制。其复杂结构又使人工合成的成本远远高于植物提取,这使得分离鉴定出其他活性较好的生物碱尤为重要。
文献报道石松生物碱中的Lycodine型生物碱具有良好的抗乙酰胆碱酯酶活性,藤石松富含该类生物碱。而且该植物在中国分布广泛,资源丰富,具有被继续开发的价值。随着进一步的开发,它必然给社会创造更大的价值。
本研究旨在提取分离藤石松中的石松类生物碱,并对其进行结构鉴定及活性测定。
三、实验方法
(一)提取分离
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