天然产物LT改善PM2.5诱导实验肺损伤的作用研究文献综述

 2023-02-07 15:22:41

一、拟研究或解决的问题在从抗炎免疫调节角度出发，探究天然产物LT对PM2.5诱导急性肺损伤的保护作用。

二、研究手段 C57BL/6J小鼠每天灌胃生理盐水或天然产物LT，持续14天；同时，在第12、13和14天灌胃结束1h后，采用非暴露式气管滴注法，将生理盐水或PM2.5混悬液气管滴注入小鼠肺内。

在最后一次造模结束后的24h，处死小鼠，解剖取肺组织进行组织病理切片观察、qRT-PCR、Western Blot等分析，比较空白对照组、PM2.5模型组、天然产物LT给药组之间的结果差异。

综合分析以上结果，阐明PM2.5和天然产物LT对小鼠的肺损伤作用机制。

2.1 仪器和试剂TH-150F中流量大气采集器（武汉天鸿仪器有限公司），超声波清洗器，冷冻干燥机，高速离心机；静脉留置针（20G），动物手术刀和手术镊，真空采血管；-80℃超低温冰箱，动物组织切片机，激光共聚焦显微镜，电泳仪，Nano-100超微量分光光度计，Eppendorf Mastercycler nexus GSX1梯度PCR仪，QuantStudio 3 Real-Time qPCR仪等。

PM2.5固体粉末，天然产物LT；RNA提取试剂TRIzol Reagent，逆转录试剂盒PrimerScript RT Master Mix，聚合酶链反应（PCR）引物，SYBRPremix Ex TaqII荧光染料；BCA蛋白测定试剂盒，炎症相关抗体；超纯水，0.9%生理盐水，4%水合氯醛，4%聚合甲醛，75%酒精等。

2.2 PM2.5样品的采集和制备使用中流量大气采集器收集PM2.5，采样流速为0.1m3/min。

PM2.5的采集地点位于南京市中国药科大学实验楼的高楼层处，收集时期为2020年9~11月，更换新玻璃纤维滤膜的周期为24h。

将收集好的滤膜用消毒后的手术剪裁成12-3cm的条状，浸入去离子水，低温超声振荡20min，重复提取四次，用8层灭菌纱布滤过，滤液冷冻干燥24h，置于-80℃超低温冰箱中避光保存。

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