开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
课题来源：自拟课题
课题依据：
1971年，Folkman提出肿瘤生长是血管依赖性的。在后期研究中有人发现，在肿瘤发展的无血管期中，肿瘤直径最多达到1～2 mm，而当肿瘤生长进入快速增殖阶段，其血管的形成使肿瘤能够获得足够的营养物质并及时带走代谢废物，从而加速肿瘤的生长。可见，肿瘤血管生成在肿瘤的发生发展过程中起到了非常关键的作用，而阻断肿瘤血管生成有望成为肿瘤治疗的新策略。
在肿瘤生长过程中，由于肿瘤内部处于缺氧状态，使低氧诱导因子（HIF）表达增加，从而影响下游靶基因的表达，如血管内皮生长因子（VEGF）表达增多，从而引起肿瘤血管生成。汉黄芩素是从传统中药黄芩中提取的有效单体，具有多方面的生物学活性，如抗炎、抗病毒、抗肿瘤等。前期研究表明，汉黄芩素可以通过VEGF-VEGFR2信号通路抑制VEGF引起的血管生成。而其是否能够影响上游肿瘤细胞分泌VEGF却未见报道。
主要解决的问题：
本课题拟利用酶联免疫法（ELISA）检测汉黄芩素对肿瘤细胞分泌VEGF的影响，并通过常用的血管生成体内外模型考察其对肿瘤细胞引起的血管生成是否存在抑制作用。
1.酶联免疫法实验（ELISA）
将人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231，人结肠癌细胞HCT-116以及人肝癌细胞HepG2分别在常氧和缺氧的条件下分瓶给药处理，给药浓度分别为0、10、20、40 mu;M。然后将培养基更换为无血清培养基。12小时后，用酶联免疫法检测各组细胞上清液中VEGF的含量。
2.transwell迁移实验
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