诺如病毒特异性抗原表位的纯化、表达及鉴定文献综述

 2023-01-16 08:01

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

研究问题:本试验通过化学合成技术合成诺如病毒的抗原表位蛋白,并对诺如病毒的抗原蛋白进行纯化、表达和鉴定的研究。

研究手段:用化学合成手段将通过文献查阅和分析的诺如病毒抗原表位蛋白的序列进行合成。并将此蛋白通过原核载体进行表达。用分离柱等方法将表达的蛋白进行分离和纯化,并将分离得到的蛋白进行鉴定以检测获得的抗原表位蛋白。

诺如病毒的特异性抗原表位的纯化、表达及鉴定

0944005 李婵

摘要:本试验通过化学合成技术合成诺如病毒的抗原表位蛋白,并对诺如病毒的抗原蛋白进行纯化、表达和鉴定的研究。用化学合成手段将通过文献查阅和分析的诺如病毒抗原表位蛋白的序列进行合成。并将此蛋白通过原核载体进行表达。用分离柱等方法将表达的蛋白进行分离和纯化,并将分离得到的蛋白进行鉴定以检测获得的抗原表位蛋白。通过表达诺如病毒抗原表位蛋白以获得检测病毒的快速检测方法。

关键字:诺如病毒 抗原表位 特异性

一、研究背景

人类杯状病毒(human calicivirus,HuCv)主要包括诺如病毒和札如病毒,是导致世界范围内人类急性、非细菌性胃肠炎的主要病原。杯状病毒的感染大多为诺如病毒。该病毒为单股正链RNA病毒,无包膜,直径约27-40mm,基因组约为7.4-8.3kb,由三个开放阅读框架组成:ORF1编码非结构蛋白,包括螺旋酶、3CL蛋白酶和RNA聚合酶;ORF2和ORF3编码结构蛋白,ORF2编码一个主要结构蛋白---衣壳蛋白(VP1),ORF3编码与衣壳蛋白相关的一个小蛋白(VP2)。

目前,杯状病毒的危害呈上升趋势,已成为发病率仅次于轮状病毒的腹泻病毒,研究表明,近年来美国90%左右的成人腹泻由杯状病毒引起;在我国多个地区也曾发生过多起暴发流行,其危害日益严重。目前对杯状病毒腹泻无特异性治疗方法,病人如果得不到及时治疗也可死于脱水和电解质紊乱。由于杯状病毒尚无疫苗,也无特异性治疗药物,因此加强病原检测,开展疫情监测,防止出现暴发疫情乃至引发社会混乱是非常必要的。但我国对杯状病毒的研究还很少,尚未开发使用于我国的快速诊断技术。并且此类病毒在感染病人粪便中排毒量少,排毒时间短,电镜检测不易发现,变异性强,加上至今尚不能体外细胞培养或感染动物,故给研究工作带来许多困难。目前,诺如病毒的检测方法主要有三类:电镜检测、分子生物学检测、血清学检测。而这些检测方法有利有弊。

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