开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）一、研究目的Bolt是一种B淋巴瘤细胞表面特征性抗原，本课题拟制备靶向浆细胞表面选择性抗原Bolt的抗Bolt盐酸阿霉素免疫脂质体，从而开发出特异性好、抗多发性骨髓瘤活性更佳、毒副作用更低的靶向递药系统，并对其质量、体内和体外抗多发性骨髓瘤活性进行初步研究。
二、研究手段1. 单链抗体sJZE00的表达、纯化与鉴定1.1 单链抗体sJZE00的表达与纯化实验室已成功构建表达单链抗体sJZE00的重组工程菌株E.coli sJZE00，重组菌在37 ℃、0.1 mol/L IPTG诱导20 h后离心收集菌体沉淀。
使用溶菌酶破壁，采用亲和层析过程中使用的binding buffer提取，加入DNase除去DNA，离心除去不溶性细胞碎片。
0.22 mu;m滤膜过滤后使用镍亲和柱进行纯化。
上样后依次使用binding buffer、20、50、100、250、500 mmol/L 咪唑洗脱，收集洗脱组分。
1.2 单链抗体sJZE00的鉴定对上述收集的洗脱组分进行15% SDS-PAGE电泳定性检测，BCA法测定蛋白浓度，以及western blot验证scFv sJZE00的表达。
2. 抗Bolt盐酸阿霉素免疫脂质体的制备2.1盐酸阿霉素脂质体的制备利用薄膜分散法制备未连接scFv sJZE00的盐酸阿霉素脂质体。
将末端连接马来酰亚胺的PEG化二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（Mal-PEG-DSPE）溶于有机溶剂，加入盐酸阿霉素水溶液后减压蒸发除去有机溶剂，残留液经超声波处理后采用G-25凝胶色谱法除去游离的盐酸阿霉素。
2.2抗Bolt盐酸阿霉素免疫脂质体的制备使用Traut试剂对scFv sJZE00进行硫醇化修饰后，与Mal-PEG-DSPE末端的马来酰亚胺进行共价连接（图1）即可制得抗Bolt盐酸阿霉素免疫脂质体。
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