开题报告内容：
一、实验背景
前列腺癌是男性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，在欧美国家其发病率居首位，死亡率高居第二位。2009年，美国有近192,000男性被新确诊为前列腺癌患者，有27,000男性死于前列腺癌。近年来，随着我国人口老龄化、生活水平的改善及诊断水平的提高，前列腺癌的发病率也明显增加。在前列腺癌发展的早期阶段，前列腺癌的发展进程主要依赖于雄激素受体(Androgen Receptor, AR)信号通路，与体内雄激素水平相关。因此，除了手术切除病灶和肿瘤局部放射治疗，前列腺癌的主要治疗手段是以手术切除双侧睾丸或药物为主的雄激素撤除治疗。尽管这种抗雄激素治疗在前列腺癌早期阶段具有很好的疗效，但是1-3年后大部分患者会发展为雄激素非依赖的前列腺癌，预后效果不佳，最终发生癌细胞转移导致死亡。因此寻找有效的治疗雄激素非依赖前列腺癌方法仍是一个重大的挑战，而了解介导前列腺癌发生发展的分子机制对于发展新的前列腺癌治疗方法至关重要。
黄酮类化合物是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮结构的化合物。而大多数黄酮类化合物都有一定的抗肿瘤作用，其机制也各不相同：如槲皮素的抗肿瘤活性与其抗氧化作用、抑制相关酶的活性、降低肿瘤细胞耐药性、诱导肿瘤细胞凋亡及雌激素样作用等有关;水飞蓟素的抗肿瘤活性与其抗氧化作用、抑制相关酶活性、诱导细胞周期阻滞等有关。在本研究中，黄酮类化合物FV-429可通过调节凋亡相关分子及信号转导通路介导癌细胞凋亡。癌细胞的G0/G1期在细胞增殖过程中具有重要作用，该时期细胞通过调节Cyclin D和CDK4等表达，推动细胞进程。黄酮类化合物可以通过下调癌细胞Cyclin、CDK等周期调控因子的表达、上调p53、p21、RB、P16等相关肿瘤抑制因子的表达，调控癌细胞周期，使其发生周期阻滞，抑制细胞生长，诱导细胞凋亡，从而发挥抗肿瘤作用。
二、实验目的与意义
本课题旨在通过体内和体外实验研究，探讨黄酮类化合物FV-429诱导人前列腺癌细胞凋亡及周期阻滞的作用及其可能的分子机制，研究FV-429对人前列腺癌细胞的有氧糖酵解、氧化磷酸化及脂肪酸代谢的调节，以及FV-429对人前列腺癌细胞代谢重编程的影响。发现FV-429诱导人前列腺癌细胞发生周期阻滞以及代谢改变之间的因果关系，为进一步研究针对人前列腺癌代谢重编程的抗肿瘤药物提供前期研究基础。
三、研究内容
本研究通过MTT实验、克隆形成实验、细胞周期及凋亡实验、Hoechst染色、线粒体膜电位检测、细胞内乳酸和葡萄糖水平的检测等实验，研究黄酮类化合物FV-429对人前列腺癌细胞的增殖、凋亡以及能量代谢改变的影响；通过Western blot实验寻找黄酮类化合物FV-429诱导前列腺癌细胞凋亡、细胞周期阻滞以及细胞代谢改变之间可能的分子机制。
四、研究手段：
MTT 实验：利用MTT法检测细胞生长的速率。接种2000-3000个细胞至96孔板中，每天或隔天检测细胞生长情况。在检测之前，在每个待检测孔中加入20mu;l MTT溶液（5mg/ml MTT溶解于PBS中），37℃孵育4h后，吸弃培养液，加入150mu;lDMSO溶解紫色结晶物。在酶联免疫检测仪在490 nm 波长下测定其光吸收值。
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