选题研究的目的和意义
肿瘤对人类生命健康造成了极大威胁。近年来，纳米递药系统尤其是脂质体(Liposomes)成为了肿瘤治疗的研究热点。冬凌草甲素（Oridonin，ORD）具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性，但由于其低水溶性、较大毒性等缺点，限制了临床应用。因此，我们考虑将化疗药物ORD与透明质酸（Hyaluronan hyaluronic acid，HA）制成前药，降低ORD毒性，同时可以实现主动靶向。Caspase 3是一种细胞内蛋白酶，且 Caspase 3在肿瘤病变细胞中的表达远远低于正常细胞。因此，可以利用Caspase 3的促凋亡作用增强化疗药物的活性。基于以上背景，我们设计出Caspase 3杂化型脂质体，考察制备方法及条件、脂质体与前药的组合比例、对杂化脂质体的性质进行表征。
研究的理论和依据
Caspase蛋白
Caspase一词系由英文Cysteine aspartic acid specific protease缩写而来，意为天冬半胱氨酸特异性蛋白酶。作为一类存在于胞质溶胶中的半胱氨酸蛋白酶，caspase家族成员功能上的共同点为可特异性切断天冬氨酸残基后的肽键。这种特异性使得caspase能够高度选择性地切割其底物蛋白结构域间的位点，使蛋白活化或失活[1]。
Caspase蛋白发现伊始即与细胞的程序性死亡密切相关，其研究最早源于对线虫(G. elegans)细胞程序化死亡的观察。研究发现，在线虫发育过程中，其进入程序化死亡的细胞中有11个基因与PCD密切相关，其中ced3和ced4基因是细胞凋亡的决定基因[1]。
后续研究中人们发现，哺乳类细胞中也存在着ced3的同源物。最早发现的白介素转化酶ICE （interleukin-1beta;-converting enzyme )，即caspase-1能够剪切IL-1beta;的前体，催化IL,-1beta;的活化。目前，己在哺乳动物中发现了14种caspase分子，即caspase 1-14。其中，与凋亡相关的家族成员主要可分为两大类，即起始caspase及效应caspase:起始caspase主要包括
caspase-2、-8, -9、-10,创门位于级联反应上游，可在其它蛋白调控下发生自我活化并激活下游的caspase家族成员;效应caspase主要包括caspase-3、-6、-7，其位于级联反应下游，可被上游的始动子激活，作用于特异性底物使细胞发生生化及形态学改变，导致细胞凋亡。除此之外，caspase-1、-4、-5、-14等主一要参与细胞因子介导的炎症反应并在凋亡途径中起到一定的辅助作用[1]。
生理情况下caspase以无活性的酶原形式存在于胞浆中。酶原分子由大小两个亚基构成，一旦被激活，则被剪切成活性形式并发生二聚化反应重新组装为四聚体活性酶。由于caspase可自我活化且剪切caspase本身而导致级联放大作用，因此一旦被激活，caspase可以瀑布式蛋白水解的方式活化，剪切活细胞内一系列底物，从而导致细胞DNA损伤、DNA修复酶失活、细胞周期阻滞以及粘附能力降低，使细胞发生凋亡并被吞噬细胞所识别并清除[1]。
