一、选题依据
糖尿病是一种严重危及人类健康的内分泌代谢性疾病。由于胰岛素分泌绝对或相对不足，糖尿病表现为血糖持续性增高并伴有高血脂症，继而引发多种并发症。近年来，糖尿病尤其是Ⅱ型糖尿病的发病率有逐年升高的趋势。大量高脂食物的摄入，导致越来越多的人表现出胰岛素抵抗的亚糖尿病状态。
胰高血糖素样肽（Glucogan like peptide -1，GLP-1）是由肠道L细胞分泌的一种重要的肠促胰岛素激素，是构成肠-胰岛轴的主要激素。GLP-1来源于胰高血糖素原基因，在肠道中由激素原转化酶3（Prohormone convertase 3, PC3）酶切为GLP-1。GLP-1的主要生理作用是促进胰岛素分泌，抑制胰高血糖素分泌，促进胰岛细胞的增值并抑制其凋亡，抑制胃排空和促进腹饱感等[1]。大量文献已经证明，GLP-1 与糖尿病有密切的关系，口服葡萄糖引起的胰岛素释放远远高于静脉注射，说明葡萄糖不仅直接作用于胰岛细胞，更重要的是作用于肠道释放GLP-1，间接增加胰岛素的释放。GLP-1是最强的刺激胰岛素分泌的激素，同时自身也具有类胰岛素的作用。GLP-1 经分泌后极易被二肽酰基肽酶（DPP-IV）降解，其半衰期只有2-5分钟。因此，目前正在开发的或已经用于临床的基于GLP-1机制的降血糖药物主要集中在开发GLP-1类似物和DPP-IV抑制剂两大类，其机理都是为了减少GLP-1的降解，增加其体内曝露量[2]。
人参为五加科植物的干燥根，为补气药之首。中医认为人参性温、补脾益肺、生津消渴，是古方中治疗糖尿病的重要药物[3]。现代研究表明，人参发挥降糖作用的主要活性成分是人参皂苷。目前，已经从各类人参中分离得到80多种人参皂苷，根据化学结构分为三型：原人参二醇型，如人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg3、Rh2等；原人参三醇型如人参皂苷Re、Rf、Rg1、Rh1等；齐墩果酸型，如人参皂苷Ro、Rh3等。大量文献报道，人参二醇型皂苷（Rb1、Rg3和Rh2）有良好的防治糖尿病作用，如口服人参皂苷Rb1能显著抑制高脂饮食诱导的Ⅱ型糖尿病大鼠的餐后血糖[4]；人参皂苷Rg3能显著改善自发性糖尿病大鼠的血糖、甘油三酯和总胆固醇水平等[5]。
前期的药代动力学研究显示，人参皂苷包括二醇型皂苷口服难吸收、生物利用度极低。如人参皂苷Rg1、Rb1、Rb2的口服直接吸收率分别只有1.9%、0.1%和3.7%[6]。血浆中的药物浓度远远达不到体外试验中发挥药效所需要的浓度，呈现典型的浓度效应矛盾, 用经典的药动学理论，即药物入血发挥疗效，无法解释其体内良好的抗糖尿病作用。药物口服难吸收，导致大量药物蓄积在肠道内，尤其是结肠部位。提示人参皂苷有可能是作用于肠道，通过肠道的内分泌系统间接发挥抗糖尿病作用。前期研究显示，另一种口服难吸收中药组分小檗碱，也具有刺激肠道内分泌细胞增加GLP-1分泌的作用[7]。同样地，与对照组相比，人参总皂苷可以增加II型糖尿病大鼠和高脂喂养大鼠的GLP-1分泌并增加回肠L-细胞的数目以及前胰岛素原基因的表达。
NCI-H716细胞来源于人未分化的结肠癌细胞，是研究GLP-1的一种成熟的体外细胞模型[8]。如前所述，人参总皂苷在体内可以增加GLP-1的分泌。同样地，在体外，人参总皂苷及其单体皂苷是否能增加NCI-H716细胞的GLP-1分泌是本课题研究的对象。另外，人参皂苷在体外模拟的高糖环境或者高脂环境下，是否仍然具有相同的作用也是我们所要关注的。尽管人参皂苷口服吸收差，但是在肠道内存在广泛的脱糖代谢，形成一系列脱糖代谢产物。如人参皂苷Rb1在肠道菌群的作用下，可代谢为Rd，Rg3，F2，Rh2， Compound K和原人参二醇（Ppd）等。这些单体皂苷在体外试验中是否能增加GLP-1的分泌也是我们关注的重点。文献报道显示，GLP-1的释放的可能与PKA，PKC，MAPK，PI3K有关，也可能受到钠葡萄糖共转运体（SGLTs）的调控[9]。人参皂苷影响GLP-1分泌的机制也是本课题所要探究的问题。
体外研究人参皂苷对NCI-H716细胞GLP-1分泌的影响将是对我们前期在体实验结果的补充，能进一步阐明人参皂苷抗糖尿病作用的物质基础。另外，体外研究更有助于探究人参皂苷引起机体GLP-1分泌增加的可能的机制。其成果有助于解释人参皂苷口服吸收差，但又良好降血糖作用的科学问题。
参考文献：
[1]Holst JJ 2007 The physiology of glucagon-like peptide 1. Physiological Reviews 87 1409-1439.
[2]Reimann F 2010 Molecular mechanisms underlying nutrient detection by incretin-secreting cells. International Dairy Journal 20 236-242.
以上是毕业论文文献综述，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
