western blot 实验优化文献综述

 2023-01-17 09:01

课题名称 Western blot 实验优化课题性质 基础研究radic; 应用课题 设计型 调研综述 理论研究研究背景 蛋白质印迹的发明者一般认为是美国斯坦福大学的乔治斯塔克(George Stark)。

在尼尔伯奈特(Neal Burnette)于1981年所著的《分析生物化学》(Analytical Biochemistry)中首次被称为Western Blot。

蛋白免疫印迹( Western Blot) 是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术。

研究目的和意义 Westernblot法应用分子生物学、生物化学和免疫遗传学中时常会用到的一种实验方法,并且是一种能对蛋白进行定性和半定量的分析方法。

现己广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。

实验内容 实验一: 封闭效果对Western曝光结果的影响. 实验二: 一抗二抗浓度和孵育时间对曝光结果的影响实验进度安排 2.242.28 查找文献,理解实验原理 3.13.15 熟悉掌握实验步骤 3.163.31 完成实验一 4.14.30 完成实验二 5.15.31 完成论文 【摘要】此文综述了western blot的实验,主要集中在介绍Western Blot的目的、原理、操作步骤、应用等【关键词】 Western Blot;封闭剂;一抗;二抗;孵育【正文】蛋白质免疫印记技术,它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法且能对蛋白进行定性和半定量的分析方法。

蛋白质免疫印迹技术【1】(Western Blot)的发明是继DNA印迹(Southern blot)和RNA印迹(Northern blot)之后发展起来的,集电泳、转印和免疫标记于一体的一项蛋白质分离检测技术。

1975年,Southern建立了将DNA转移到硝酸纤维素膜(NC膜)上,并利用DNA-RNA杂交检测特定的DNA片段的方法,称为Southern[2]印迹法。

而后人们用类似的方法,对RNA和蛋白质进行印迹分析,对RNA的印迹分析称为Northern印迹法,对单向电泳后的蛋白质分子的印迹分析称为Western印迹法,对双向电泳后蛋白质分子的印迹分析称为Eastern印迹法。

蛋白质印迹的发明者一般认为是美国斯坦福大学的乔治斯塔克(George Stark)。

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