开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
实验目的:研究白芍总苷胶囊对NOD小鼠颌下腺组织炎症因子的影响。
试剂配制:
(1)硫酸羟氯喹混悬液的配制:取一片硫酸羟氯喹片,碾磨成粉,加入12.5 ml 0.5% CMC-Na,研磨为均匀混悬液,冰箱保存。硫酸羟氯喹混悬液浓度:8mg/ml,小鼠给药容积:0.2ml/20g,剂量为80mg/kg,给药前混匀。
(2)白芍总苷高剂量混悬液的配制:称取1.26g白芍总苷,加17.5ml的0.5%CMC-Na,研磨为均匀混悬液,4℃冰箱保存。
(3)白芍总苷中剂量混悬液的配制:取7.5ml的白芍总苷高剂量混悬液,加入7.5ml的0.5%CMC-Na,研磨为均匀混悬液,4℃冰箱保存。
(4)白芍总苷低剂量混悬液的配制:取5ml的白芍总苷中剂量混悬液,加入5ml的0.5%CMC-Na,研磨为均匀混悬液,4℃冰箱保存。
实验流程:将8周龄的雌性NOD小鼠(体重18~22g)按体重随机分为溶媒对照组、阳性对照羟氯喹组、白芍总苷胶囊最高、高、中、低剂量组。连续灌胃给药16周,每周测定小鼠的平均进食量和饮水量;分别在给药第2、8、16周每组处死8只,取颌下腺,用ELISA试剂盒测定其中白介素(IL)-1beta;、IL-6以及TNF-alpha;、IFN-gamma;的含量,用qPCR测定TNF-alpha;、IL-17A、CXCL9、CXCL13以及BAFF的mRNA表达,用Western blot 测定IL-17A以及BAFF的蛋白表达。
疾病背景:因导管的阻塞和狭窄而导致颌下腺逆行性炎症,称为颌下腺炎,常与涎石并发。临床表现主要为颌下腺肿大,疼痛,有脓性分泌物自导管口溢处。本病成年人发病率高,大多系慢性表现。因为有较有效的治疗药物和方法,治愈率较高。未及时接受治疗者,未经正规治疗者,疗效欠佳,因此,早治疗是关键。
药物现状:白芍总苷为白芍饮片提取的总苷。按干燥品计算,含芍药苷(C23H28O11)不得少于40.0%。采用生化提取,可从白芍干燥根中得到芍药苷 (paeoniflorin) 、羟基芍药苷 (hydroxy-paeoniflorin) 、芍药花苷 (paeonin) 、芍药内酯苷 (albiflorin) 、苯甲酰芍药苷 (benzoylpaeoniflorin) 等具有生理功效成分的混合物,总称白芍总苷 (total glucosides of paeonia , TGP) 。其中,芍药苷的含量占总甙的 90% 以上。
