巨噬细胞来源外泌体对肝星状细胞活化的调控作用及机制研究文献综述

 2023-02-07 15:16:18

课题名称 巨噬细胞来源外泌体对肝星状细胞活化的调控作用及机制研究课题性质 radic; 基础研究应用课题 设计型 调研综述 理论研究开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）1、实验目的本研究旨在探究巨噬细胞来源外泌体对肝星状细胞的调节作用及机制。

2、研究思路（1）巨噬细胞对肝星状细胞活化的调控作用体外培养巨噬细胞并诱导其向M1型或M2型分化，分别将M0型，M1型，M2型巨噬细胞与肝星状细胞共培养，并设置阴性对照组。

分别提取肝星状细胞内的RNA，逆转录后通过PCR扩增与凝胶电泳，检测特定基因片段的含量，进而检测肝星状细胞活化情况。

分别提取肝星状细胞内的蛋白，进行Western Blot，检测特定蛋白的表达含量，检测肝星状细胞的活化状态。

确认M2型巨噬细胞对肝星状细胞的活化有促进作用。

（2）M2型巨噬细胞外泌体对肝星状细胞活化的调控作用提取M2型巨噬细胞外泌体，并进行荧光标记。

将其与肝星状细胞共培养，进行激光共聚焦成像，确认外泌体能够被肝星状细胞摄取利用。

提取M0型与M2型巨噬细胞外泌体，分别将肝星状细胞与M0型巨噬细胞，M0型巨噬细胞外泌体，M2型巨噬细胞，M2型巨噬细胞外泌体共培养，检测肝星状细胞的活化状态；分别将肝星状细胞与M0型巨噬细胞，外泌体分泌抑制剂处理的M0型巨噬细胞，M2型巨噬细胞，外泌体分泌抑制剂处理的M2型巨噬细胞共培养，检测肝星状细胞的活化状态。

确认外泌体是M2型巨噬细胞调控肝星状细胞活化的关键。

在纤维化模型小鼠中，通过给予外泌体分泌抑制剂，进一步证明巨噬细胞通过分泌外泌体调控肝星状细胞的活化状态，进而调节肝纤维化发生发展过程。

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