三叶青组织培养培养中褐化控制研究文献综述

 2023-01-12 17:21:45

1．课题来源、选题依据和意义

三叶青是我国传统的优质中药，性凉，味微甘、辛，归心、肝、肺、肾经，具有清热解毒，祛风化痰，活血止痛的作用。其果具有滋补功效，属极品。本课题主要研究三叶青组织培养中对褐化现象的控制条件，优化三叶青的培育过程。

三叶青对热症、各种水肿蛇伤等有独特疗效，有很强的消炎，抗病毒等功效，是西药无法代替的植物抗生素，在民间有非常长久的使用历史。它不仅可以有效地治疗病毒性脑膜炎、肺炎、胆道感染及眼睑蜂窝织炎等感染性疾病，还能减缓癌细胞的生长速度，诱导癌细胞凋亡，有非常高的药用价值和经济价值。

野生三叶青对生长环境的要求十分苛刻，成才时间长，人工种植却难度高，成功案例少。因而在实现三叶青的可持续发展上，块根生产，组织培养和设施栽培等人工繁殖培育技术具有关键的作用。我们用三叶青的块根作为外植体进行组织培养，选取培养抗褐化作为课题，致力于优化组培过程，以期在短期内获得大量品质优良的植株。

褐化是中草药组织培养细胞培养中常见的不利现象，一般是因为切口的酚类物质被多酚氧化酶氧化为褐色的醌类，这些成分外流深入培养基中，抑制其他酶的活性，导致外植体死亡。即使是正确且快速的接种操作方式也不能完全阻止褐化的产生，而在培养基中加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、活性炭(AC)等吸附剂或抗坏血酸（Vc）、柠檬酸等抗氧化剂可以有效的预防这种问题。

正宗三叶青由于生态的破坏和过度的资源开发，已经成为濒危稀缺的中药资源。而目前市场上流通的劣质三叶青药材又迷惑着消费者的耳目。为了打击劣质药材的嚣张气焰，保护广大人民群众的健康和消费权益，为三叶青正名，发展并实现三叶青的可持续发展工作十分重要，具有重大而长远的社会意义。

2．课题研究目标：

（1）利用三叶青块根作为外植体进行组织培养快速繁殖，研究其生长过程的褐化现象，掌握三叶青在稳定条件中组培的生长规律，进一步了解环境对其生长的影像。

（2）用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、柠檬酸作为添加剂观察三叶青组培快繁过程中褐化的程度，探索比较适宜的生长环境。

（3）实现三叶青组培的优化，提高三叶青植株成长的成功率和三叶青植株的质量。

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