拟研究问题:
肢体后适应是指在组织缺血再灌注之后,对远隔肢体进行的一系列短暂的血管闭再灌注操作,以诱导组织针对缺血再灌注损伤产生内源性保护作用,减少组织器官缺血再灌注损伤。近年来肢体后适应临床应用广泛,对治疗缺血后再灌注损伤的治疗效果也较佳。本课题拟考察肢体后适应对动脉结扎致小鼠脑缺血再灌注损伤的影响,并初步探讨可能的作用机制,为肢体后适应临床防治脑中风提供进一步的实验依据。
采用的研究手段:
本实验拟采用大脑中动脉结扎1.5小时,再灌注24小时诱导的大鼠脑缺血再灌注损伤模型,利用再灌注后开始后不同时间段对一组作肢体后适应操作,另一组则不做肢体后适应操作与假手术的三组模型,考察手术后给予肢体后适应操作对大鼠神经行为学评分,脑组织形态学,脑与组织MPO含量测定等指标的影响。
(一)神经行为学评分
在脑缺血1.5小时再灌注24小时后,进行神经行为学评分。神经行为学由本位反射测定、前肢放置测定、尾部悬空测定等步骤评分
(二)采用HE染色评价脑损伤程度
在脑缺血1.5 小时再灌注24 小时后取脑,灌流取材后做冰冻切片,用HE 染色法观察梗死区肢体后适应组组与模型组之间的差异,从而评价药物对缺血性脑损伤的改善程度。
(三)组织样本MPO测定
在脑缺血1.5小时再灌注24小时后,心脏灌流处死取脑后再取后肢并剔骨,取腓肠肌。称取脑及后肢0.03-0.06g,匀浆离心取清液,再加MPO测试液,测定MPO含量。
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