一、背景及意义
兽用抗生素作为饲料添加剂及防病药物在畜牧以及水产养殖中被广泛应用，目前我国兽用抗生素类药物的生产和使用量都居于世界的首位，并普遍存在兽用抗生素滥用的情况。被大量使用的抗生素都会以原物或代谢物的形式随粪便及尿液直接排放到环境中。近年来，许多文献表明，全球范围内许多地区的土壤、水体以及底泥，甚至饮用水中都可以检出抗生素的存在，其种类也越来越多,并且在养殖业较为发达的地区，情况尤为严重。Pruden等人在2006年的撰文中指出，抗生素污染所诱导的抗性基因与抗生素作为污染物一样，可能是一种新型环境污染物，而且其风险要比抗生素药物本身的污染风险高，可提高环境中微生物的整体抗性水平，降低常用抗生素药物的作用效果，并且可直接对人类以及动物的健康造成负面影响[6]。
由于许多学者担心这可能会对人类的生存和健康产生不利的影响，目前兽药抗性基因对环境的影响正受到越来越多研究人员的关注，研究还处于起步阶段，兽药抗性基因在环境方面的报道还相对比较少，但作为新的研究热点，兽药抗性基因对环境污染的危害势必将成为今后环境领域重要的研究方向。
本实验围绕目前兽药抗性基因污染这一新的环境研究热点，针对目前兽药四环素抗性基因对环境影响机制报道较少的情况，选取国内环境中目前检出率较高的三种四环素抗性基因（tetC，tetA，tetE），对土壤中耐四环素类药物细菌的群落组成进行研究，并且鉴定相关耐药基因。
二、实验内容
1.根据课题查阅相关文献，了解提取DNA以及质粒的原理方法，PCR技术的原理和方法以及琼脂糖凝胶电泳的原理和方法。
2.采集修正药业（北京）附近养猪场周围耕地土壤样本
3.提取土壤总DNA
4.分离土壤抗性菌
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