自拟课题课题依据：千层纸素（Oroxylin A, ）是黄芩的有效成分之一，属黄酮类化合物，分子量为284.27，黄色晶体。
近年来，研究人员发现千层纸素在抑制细胞增殖、促凋亡、促细胞周期阻滞、抑制血管生成、抑制侵袭等方面均有显著作用。
千层纸素药理作用广泛,其抗肿瘤作用目前尚未完全阐明[1]。
沉默信息调节因子样蛋白亚型3（SIRT3) 是线粒体内重要的去乙酰化酶，目前已发现的其作用底物有氨酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶等能量代谢相关的关键酶类[2]，通过对这些底物的去乙酰化作用，参与调节线粒体的功能，平衡内环境的稳态，严格调控着细胞的糖酵解、三羧酸循环和呼吸链等代谢过程以及线粒体功能， 在物质代谢活跃的组织如肌肉、肾脏和心脏中高表达［3,4］，SIRT3 参与 HIL 合成，尿素循环，脂肪酸的有氧氧化过程，在能量代谢、基因保护、细胞存活及延长寿命中发挥重要作用[5]。
HIF-1alpha;是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子，它最先由SEMENZA[6] 等于1991年在缺氧诱导的细胞核抽提物中发现，由HIFlalpha;和HIFlbeta;两个亚单位组成，其中HIF1a是主要的氧调节亚基，可以调节多种靶基因如萄葡糖转运因子、血和内皮生长因子(vEGF)、红细胞生成素等的表达，对维持肿瘤细胞的能量代谢、刺激新血管生成、促进肿瘤增殖和转移起重要作用[7] 。
低氧条件下，肿瘤细胞中低氧诱导因子HIF-1alpha;上调，后者激活糖酵解通路，并为细胞的存活提供ATP。
课题拟通过Western blot、RT-PCR等分子生物学手段，研究千层纸素低氧条件下通过SIRT3调节HIF1alpha;稳定性的作用机制。
研究手段1通过WB方法千层纸素在低氧条件下对Sirt3、HIF1alpha;和PHDs蛋白水平的影响。
【1】、体外细胞培养[8] 细胞以适宜浓度接种于培养瓶，置于37 C恒温、常氧采用5% CO2、21% O2及饱和湿度的培养箱中培养；低氧采用5% CO2、1% O2及饱和湿度的培养箱中培养，细胞呈贴壁生长。
每2-3天传代一次，传代时用0.02% EDTA消化2-3 min，弃去消化液，加入新鲜培养液吹打均匀，按所需细胞量移入新培养瓶中，添加完全培养液至适量。
以上是毕业论文文献综述，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
