化学交联解析蛋白质结构的研究摘要:研究蛋白质的空间结构信息及其相互作用对于了解蛋白质的功能具有重要意义。
化学交联剂是能够和蛋白质反应的带有双功能团的化学试剂。
通过功能团和氨基酸残基反应,偶联两个蛋白质或者更多的蛋白质形成网状交联[1]。
功能团决定了交联剂的反应特异性。
化学交联结合质谱鉴定技术,是指用小分子交联剂将蛋白质中特定类型的残基共价交联上,再用蛋白酶将其降解为肽段,然后使用液相色谱串联质谱(LC-MS / MS)进行分析鉴定被交联的肽段以及交联位点的一种方法[2,13]。
化学交联技术与质谱技术相结合,相对于传统的核磁共振技术,X射线晶体衍射技术等,对蛋白质的纯度,绝对量和结晶性要求较低,具有灵敏度高,特异性强,成本低,对蛋白质性状要求低等优点。
本次设计以溶菌酶为研究对象,采用化学交联技术对其结构进行研究。
关键词:化学交联,质谱,蛋白质组学,溶菌酶蛋白质结构与功能分析,蛋白质之间的相互作用,一直是蛋白质组学极为重要的研究领域。
蛋白质结构与功能的研究方法目前主要有X射线衍射法 (X-ray crystallography)、核磁共振波谱法 (nuclear magnetic resonance spectroscopy,NMR) 和低温电镜法 ( cryo-electronmicroscopy, cryo EM)[3,4]等。
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