川贝母薄层鉴别一、课程解决的问题川贝母是常用止咳化痰中药,来源于卷叶贝母(Fritillaria cirrhosa D. Don)、暗紫贝母(F. unibracteata Hsiao et K. C. Hsia)、甘肃贝母(F. przewalskii Maxim)、梭砂贝母(F. delavayi Franch)、太白贝母(F. taipaiensis P.Y.Li)和瓦布贝母(F. unibracteata Hsiao et K. C. Hsia var. wabuensis(S. Y. Tang et S. C. Yue)Z. D. Liu, S. Wang et S.C.Chen)的干燥鳞茎,是一种典型的多基原中药。
甾体生物碱是川贝母的主要活性成分,制订质量评价方法时通常考虑选用其作为指标成分。
但是,由于川贝母基原复杂,甾体生物碱成分在药材中含量低且种间差异较大,导致现阶段对川贝母的质量控制水平不高。
2020版《中国药典》中川贝母的薄层色谱鉴别采用贝母素乙作为指标成分,专属性不高同时存在在不同基原川贝母中含量差异大,灵敏度低的问题,含量测定采用酸性染料比色法测定总生物碱,方法专属性差。
本实验室前期研究发现HPLC-ELSD测定川贝母中甾体生物碱存在含量过低的问题,因此本研究拟建立一个以六种基原川贝母中含量较高且较为稳定存在的成分作为指标成分的薄层色谱半定量鉴别方法,同时实现定性鉴别和半定量分析,为进一步完善川贝母的薄层鉴别方法提供参考依据。
二、研究方法和技术路线 建立川贝母药材薄层鉴别方法,选择在六种川贝母基原中共有且含量较高的成分作为指标成分。
该方法能够实现区分川贝母药材和其混伪品轮叶贝母、土贝母等。
优化展开系统,得到一个重现性良好的薄层色谱条件展开系统,可参考以下展开系统:(A)环己烷:乙酸乙酯:三乙胺(10∶10∶1),(B)乙酸乙酯:甲醇:氨水:水(18∶2∶1∶0.1),(C)乙酸乙酯:甲醇:氨水:水(25∶1∶1∶0.1),(D)氯仿:醋酸乙脂:二乙胺(4:4:1),(E) 正己烷:乙酸乙酯:二乙胺(12∶10∶1),(F)乙酸乙酯:石油醚:甲醇:氨水( 10∶10∶2∶1)的上层溶液。
此外,由于现有显色方法(稀碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇溶液)显色结果的平行性难以控制,且显色效果不够清晰,因此需进一步优化得到显色清晰且操作平行可控的显色方法。
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