开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
背景介绍
急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)是血液系统常见的恶性肿瘤性疾病,主要表现为幼稚或成熟T、B淋巴细胞克隆性异常增殖,浸润骨髓、血液或其他器官和组织,引起骨髓造血功能异常、免疫功能紊乱,其生物学特征多样,临床异质性大。成人ALL患者诱导缓解率可达到85%~90%,总体生存率可达40%~50%,大大改善其预后,但多数患者最终复发,长期生存率低。
GL-V9属于黄酮类化合物,是中药黄芩中有效单体汉黄芩素的衍生物。目前已有文献证明,GL-V9具有抑制肿瘤生长;促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞侵袭转移,逆转缺氧耐药的药理作用。GL-V9与汉黄芩素相比水溶性较好。
研究内容
本课题采用的T-ALL细胞株为Jurkat细胞株。通过研究GL-V9在高剂量下诱导Jurkat细胞发生凋亡,在低剂量下诱导Jurkat细胞发生有丝分裂灾变作用,揭示其抑制肿瘤生长的作用机制。我们首先确定给药剂量及给药方式,通过不同研究手段观察GL-V9对ALL细胞的有丝分裂灾变作用药效,探究诱导有丝分裂灾变作用的机制。
主要研究手段
(1)MTT实验
原理是活细胞内的琥珀酸脱氢酶能将淡黄色的MTT还原为蓝紫色的结晶甲臜。后者结晶产物的量与活细胞数目成正相关。结晶用DMSO、无水乙醇、酸化异丙醇等溶解,在酶标仪上以波长为490 nm进行比色,对于发生了有丝分裂灾变作用的细胞来说,它们产生的过氧化物较少,产生的结晶甲臜较少,所检测的吸光值也较小。由此可以判断药物对细胞的生长抑制程度。
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