NCB-1的提取结晶工艺研究文献综述

 2023-02-16 06:02

一、课题的研究背景、意义和目的

抗生素应用现状

抗生素是一类重要的药物,是二十世纪医药界的伟大成就之一。自1928年弗莱明发现青霉素和1942年瓦克斯曼发现链霉素以来,抗生素为人类的健康事业做出了卓越的贡献。由于抗生素的广泛应用,使许多细菌感染的疾病基本上得到了控制。例如传染性很强的流行性脑膜炎,死亡率很高的细菌性心内膜炎,以及严重威胁生命的肺炎,都可以用青霉素进行有效的治疗。又如过去人们闻之色变的鼠疫、天花、疟疾等传染疾病,在利用抗生素进行治疗后,得到了有效的控制。抗生素在对付真菌感染引起的疾病方面也有一定的疗效。

耐甲氧苯青霉素的金黄色葡萄球菌(MRSA),是目前医院感染的主要原因,对多种抗生素具有耐药性。该耐药菌出现后以很快的速度在全世界范围内广泛传播。耐甲氧苯青霉素的金黄色葡萄球菌(MRSA)对beta;-内酰胺抗生素的抗性来自mecA基因,该基因在编码产生盘尼西林结合蛋白(penicillin-binding protein-PBP)的基础上额外编码了另一种盘尼西林结合蛋白,被称作PBP2,PBP2a,或者 MecA。这种额外产生的盘尼西林结合蛋白可以与beta;-内酰胺结合,从而使该耐药菌具有对beta;-内酰胺抗生素的耐药性。这就把我们的用药选择限定在仅有的几种抗生素,比如糖肽类抗生素-万古霉素和替考拉宁,被认为是耐甲氧苯青霉素的金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的最后一道防线。然而,1997年Hiramatsu等从临床分离到一株对万古霉素具有较弱抗性的耐甲氧苯青霉素的金黄色葡萄球菌(MRSA),被命名为Mu50,最低抑菌浓度(MIC)为8mu;g/ml。随后具有相似万古霉素耐药性的耐甲氧苯青霉素的金黄色葡萄球菌(MRSA)就在全世界各地陆续被发现。按照英国化学治疗协会的标准,这类对万古霉素的最低抑菌浓度(MIC)大于8mu;g/ml的菌株被命名为耐万古霉素的金黄色葡萄球菌(VRSA),它们对万古霉素的抗性来源于细胞壁的增厚以及细胞壁中谷氨酰胺胞壁酸的比率的升高。2002年,携带vanA基因的耐万古霉素的金黄色葡萄球菌(VRSA)在美国发现,其对万古霉素的最低抑菌浓度大于128mu;g/ml。vanA介导的万古霉素抗药性是来自其编码的细胞壁前体物质,该物质的独特结构可以与万古霉素结合。因此,由万古霉素和替考拉宁组成的最后防线已经岌岌可危,新型抗生素的开发变的尤为重要。

课题研究的主要内容

1.绘制标曲

称取某一批号纯度97%,4mg,加入5mlEP管中。再加入1mlDMSO,震荡溶解,配制成4mg/ml的A溶液。先取300ulA溶液加入2.7mlDMSO配制成0.4mg/ml的B溶液。分别取800ul、600ul 、400ul 、200ul 、100ul B溶液加入5mlEP管中分别加入200ul、400ul 、600ul 、800ul 、900ul DMSO分别配制成0.32mg/ml、0.24mg/ml、0.16mg/ml、0.08mg/ml、0.04mg/ml的溶液。用岛津高效40min362nm的方法测这6个浓度梯度的溶液。绘制峰面积与浓度的曲线图。

2.考察萃取溶剂

将摇瓶发酵液混匀后分成5份,分别加入MTBE、乙酸乙酯、甲醇、正己烷、四氯化碳,以1:1的比例上下震荡混合,放入高速离心机离心后,离心分层拍照,分别取有机相和水相,有机相旋蒸浓缩后用DMSO溶解,岛津检测。

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