一、实验目的
构建并表达Jagged2胞外区真核表达载体
二、研究方法
运用基因工程技术构建重组jagged2表达载体
三、实验内容
1、重组jegged2真核表达载体的设计与合成
从UniProt数据库中获得Jaggede2 mRNA序列（NM_002226）。TRIzoL法抽提HeLa细胞株的RNA，逆转录后以 HeLa细胞株的cDNA为模板，[3]根据Jagged2全编码区基因序列，设计引物[7]。通过引物合成将Jagged2基因上游加入酶切位点BamHI，下游加入酶切位点EcoRI。两端分别引入限制性内切酶EcoRI和 BamHI后所得的PCR产物与表达载体pcDNA3.1连接，并于Jagged2基因碳端加入His标签。
2、重组质粒pcDNA3.1-jagged2的酶切和测序
将重组质粒pcDNA3.1-Jagged2用Bam H I和Eco R I限制性内切酶进行双酶切验证[6]，酶切体系如下：DEPC H2O 30mu;L,10times;K buffer 5mu;L,BamHI 2.5mu;L,重组质粒10mu;L,37℃恒温水浴中酶切4h。并将重组质粒测序。
3、重组质粒pcDNA-Jagged2电转染CHO细胞
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